美国 MasterBond 胶水
EP3HTMed：α辐射对培养的猪主动脉细胞的相对生物学效应
应用
这篇论文的作者试图设计一个实验，使用培养的猪主动脉内皮细胞作为人体组织的替代品，评估来自外部polonium-210源的α辐射的RBE。由于摄入钚-210与高肉饮食有关，尤其是驯鹿，这项工作旨在深入了解与这种活动相关的风险。此外，这项工作试图开发一种使用外部辐射源测定RBE的改进方法；其他常见的方法需要向细胞培养基本身添加放射性盐。为了进行这些重要的实验，使用耐高压灭菌的Master Bond EP3HTMed创建了一个测试装置，这是一种单组分环氧树脂，符合USP VI级和ISO 10993-5标准，用作生物相容性环氧树脂。
关键参数和要求
在图1所示的测试组件的构造中，实验人员需要一种粘合剂将玻璃支撑环粘合到薄的聚酯薄膜上。这层厚度为2.5 μm的聚酯薄膜能够将来自钋-210源的易衰减α粒子传输到测试细胞中。除了在玻璃和聚酯薄膜之间形成牢固的水密粘合外，粘合剂还必须具有抗高压灭菌的能力，以及生物相容性和无细胞毒性。由于实验主要是评估猪内皮细胞的持续生存能力，因此测试设备本身不会对细胞造成伤害是至关重要的。在测试设备组装后，在引入细胞组织之前，对设备进行灭菌是至关重要的。高压灭菌，暴露在高温和高压下，是一种有效和常用的手段，用于灭菌和破坏任何可能干扰科学实验的微生物污染物。实验人员将玻璃支撑环粘接在聚酯薄膜上，制成了如下图所示的仪器;环氧树脂在150℃下固化10分钟。然后将盘子从多余的聚酯薄膜上切下来，检查水密性，然后进行高压灭菌。
图1所示。60毫米塑料培养皿
(A)， Po-210辐射源，(B)，较大的聚酯膜碟(C)，较小的含有测试细胞的聚酯膜碟(D)。主键EP3HTMed，用金色表示，用于将玻璃支撑环粘接到碟C和D底部的薄聚酯膜片上
Master Bond EP3HTMed是一种单组分热固化环氧树脂，符合USP VI级和ISO 10993-5的生物相容性。这些都是严格的协议，以确保任何塑料，橡胶，粘合剂或密封剂用于植入医疗设备的结构不具有细胞毒性。在认证过程中，从待认证材料中提取的各种提取物被引入细胞培养或直接用于测试动物;然后对测试标本进行评估，以确保提取物不会产生任何毒性。对于此应用，符合USP VI级和ISO 10993-5的粘合剂可确保粘合剂本身不会干扰实验人员在实验期间对细胞活力的评估。Master Bond EP3HTMed还具有优异的耐高压灭菌性——图2显示了EP3HTMed与标准环氧树脂相比的耐高压灭菌性。较低的重量变化表明在反复的高压灭菌器循环中对严酷的温度和压力有更大的抵抗力。
除了满足生物相容性要求和具有高压灭菌性外，Master Bond EP3HTMed是一种多功能的单组分热固化环氧树脂，在使用前不需要测量或混合。它能很好地粘合各种基材，包括玻璃、金属、陶瓷和大多数塑料。它具有-60至+400°F(-51至+204°C)的广泛使用温度范围，并且具有出色的强度和模量。
图2。与标准环氧树脂相比，Master Bond EP3HTMed的耐高压灭菌次数超过100次。较低的重量变化表明对高压灭菌器恶劣条件的抵抗力更强。
结果
实验人员使用图1所示的装置测定了猪主动脉内皮细胞的相对生物有效性(RBE);这种方法采用外部辐射源这一研究领域的另一种常用方法是使用内部辐射源——在这种方法中，将枸橼酸钋-210添加到细胞培养物中并稀释。他们的工作表明，与内部辐射源方法相比，外部辐射源方法提供了更一致的剂量反应。使用Master Bond EP3HTMed的测试设备的构造允许更准确和可重复的方法来评估RBE。
图3。从4个不同终点对培养的猪主动脉内皮细胞的相对生物学有效性(RBE)进行了测定。猪RBE值是通过外部钋-210 α发射器源测定的。牛的RBE值由内部辐射源确定，引用自先前的工作
从图3所示的数据可以看出，与用内放射线法测量的牛RBE值相比，用外放射线法测定的猪组织RBE值遵循一个逻辑级数，并且显示出更一致的剂量反应RBE值由外部α辐射系列的确定斜率除以参考辐射(x射线)系列的斜率来确定。通过在一定剂量范围内辐照样品，构建了剂量响应曲线;然后通过各种标准方法评估辐照后的细胞单层，以确定细胞活力、活细胞数量、乳酸脱氢酶(LDH)释放和克隆存活分数的变化。
实验结果表明，外辐射源法是测定RBE值的一种简便、优越的方法。相对于内法，对剂量法进行了简化;当使用内部方法时，放射性钋-210柠檬酸必须添加到培养基本身，这意味着在菌落形成期间额外的辐射剂量传递到细胞。外部方法简化了剂量测定，因为不向细胞提供剂量，除非将其固定在测试装置中，以便更好地控制剂量和确定暴露时间。使用主键EP3HTMed，实验人员能够构建一种测试仪器，该仪器允许一种更可靠和简单的方法来确定RBE值，并评估与来自钋-210源的alpha照射有关的细胞损伤程度。
References
1 Thomas, P., Tracy, B., Ping, T, et al. International Journal of Radiation Biology. Relative biological effectiveness (RBE) of alpha radiation in cultured porcine aortic endothelial cells. Volume 83; 2007, pp. 171-179.
2 Thomas, P., Tracy, B., Ping, T., et al. International Journal of Radiation Biology. Relative biological effectiveness (RBE) of polonium-210 alpha particles vs. x-rays on lethality in bovine endothelial cells. Volume 79; 2003, pp. 107-118.
