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水平电泳相关知识
凝胶浓度
分离片段的大小范围决定了凝胶的琼脂糖浓度选择。典型的琼脂糖浓度为0.5%到3.0%。对于大DNA片段,需要低浓度凝胶,而对于小DNA片段,则推荐高浓度凝胶。弱凝胶(0.5%琼脂糖)应在低温(如-4°C)下电泳。0.75%到1.0%的琼脂糖凝胶适用于常规电泳,适合分离范围为0.15到15 kb。2%到4%的琼脂糖凝胶通常用于PCR片段分辨。如果凝胶需要后续拍照,使用薄的低浓度琼脂糖凝胶(2到3毫米)比厚的高浓度凝胶效果更好,因为后者会增加不透明度和自发荧光。
电泳缓冲液
TAE缓冲液对于分辨大于4 kb的片段效果最佳,而0.1到3 kb的片段应选择TBE缓冲液。TBE具有更高的缓冲容量和较低的导电性,因此适用于高电压电泳。此外,TBE在相同电压下产生的热量较少,并且不会导致显著的pH漂移。注意:由于其较低的缓冲容量,TAE缓冲液应在全长电泳过程中不时循环或混合,特别是在高电压下。
温度影响
高电压电泳会产生热量。此外,高导电性的缓冲液如TAE比低导电性的缓冲液产生更多热量。在使用电压超过175 V的琼脂糖凝胶电泳时,应注意热量积累,这可能导致凝胶出现S形迁移前沿等伪影,甚至在长时间电泳中融化凝胶。在高电压电泳中,应避免使用低熔点琼脂糖凝胶。
RNA迁移性
RNA在电泳前或电泳过程中应进行变性。例如,使用乙醛和二甲基硫氧化物变性后的RNA片段可以在中性琼脂糖凝胶上分离,或者在含有甲基汞氢氧化物或甲醛的琼脂糖凝胶上分离。RNA样品通常需要较长的电泳时间或容易耗尽的缓冲液,因此需要循环缓冲液。北方印迹分析通常不应在迷你电泳槽上进行。
分离性能
凝胶浓度、电泳缓冲液、电压、温度、构象和溴化乙锭的存在都会影响分离结果。为了监测双链DNA的进展,通常在电泳缓冲液中加入溴化乙锭(0.5 µg/ml)。该染料的荧光特性允许在紫外灯下可视化条带。然而,溴化乙锭可能会使DNA迁移速率降低约15%。作为替代方案,电泳后,可以将凝胶在溴化乙锭溶液(0.5 µg/ml H2O)中染色15至60分钟,然后在紫外线透射仪上观察或拍照。
提高分辨率
在缓冲液体积较少的设备中,可以使用2倍TAE缓冲液以提高长时间电泳的分辨率。
EHS1000系列,水平单元,概述
- 低成本
- 注塑结构
- 耐用、防漏环境,确保安全和长寿命
- 卡式电极
- 价格便宜,易于更换。由99.99%耐腐蚀的纯铂制成。
- 多种凝胶托盘
- 每个单元可以精确匹配凝胶尺寸和样品数量要求,并提供额外的凝胶托盘尺寸选项。
- 这消除了因凝胶尺寸或应用变化而需要多个凝胶槽的需求。托盘中没有影响样品流动的凹槽或铸造门槽,可以使用传统的胶带铸造(如有需要)。
- 易于使用
- 防漏“插拔即用”铸造挡板允许在电泳过程中快速外部铸造凝胶。
EHS1050
迷你快速水平单元,凝胶尺寸
缓冲液体积: 10x 8 cm
样品容量:50ml
设备尺寸:15x15x4 cm
推荐电源:EV2650
描述
迷你快速水平单元是一个完全自包含的系统,旨在快速检测样品。凝胶铸造、运行和分析均在同一超紧凑的设备中完成。
缓冲液和凝胶体积被控制在最小,平行电极排列允许超高效的电流传输,使分辨率在30分钟内完成。
UV透明底座允许直接在UV透射仪上观察,无需耗时的转移和潜在的凝胶损坏。
双槽设计允许每个凝胶加载多达40个样品,同时与多通道移液器兼容的梳子进一步提高了速度和便利性
完整货号 描述
EHS1050-SYS 迷你快速单元,挡板,2个梳子:8个样品,1.5mm
梳子
EHS1050-C16-1.0 1毫米厚,16个样品,15 µl
替换配件
EHS1050-GATE 铸造挡板(每包2个)
EHS1100,迷你水平单元
凝胶尺寸:7x7cm
缓冲液体积: 7×10 cm
样品容量:225ml
设备尺寸:21x9x9 cm
推荐电源:EV2650
EHS1100 是该系列中最小的单元,设计用于处理少量到中等数量的样品。小型凝胶尺寸最大限度地提高了运行经济性,但不妨碍其多功能性。这个紧凑的单元能够分辨多达64种不同的样品
完整货号:
EHS1200,中型水平单元
凝胶尺寸:10x7cm, 10x7cm
缓冲液体积:300ml
样品容量:100
设备尺寸:300ml
推荐电源
- EV2650
- EV2310
EHS1200允许每个凝胶分辨更多的样品,而无需显著增加缓冲液或凝胶体积。每个凝胶可以分辨100个样品,使该单元非常适合那些经常检查中等数量样品且电泳时间较短到中等长度的应用
货号: